南美白對蝦原產於太平洋東岸的中南美洲地域，具生長快速、換肉率高、適鹽性廣及養殖門檻相對較低之優勢，是目前全球最重要之水產養殖物種之一。近年來由於集約式養殖、養殖環境管理不當及藥物濫用等綜合性因素，使白蝦養殖之環境條件日趨劣化，造成白蝦產量大幅減少及龐大的經濟損失。以往蝦病原入侵發病之時，養殖戶常以投餵抗生素進行治療，但抗生素使用容易產生食品安全與病原菌產生抗藥性之疑慮。目前尋找可取代抗生素之免疫調節物已成為研究趨勢，藉由飼料中添加生物活性的中草藥或益生菌等，其生物活性有功能如抑制細菌、抗氧化能力，或改善白蝦提高抗病能力達到增加活存率，同時兼顧提升白蝦在成長表現。構樹葉已被證明具有鎮痛、消炎、抗氧化、改善腸道菌相與提升免疫力等多種功效。然而，構樹葉成分中的纖維素較多且活性成分較為複雜，使生物腸道不易吸收，葉子因此需以微生物發酵後增加其生物活性再進行餵食。本研究旨在探討飼料中添加枯草桿菌發酵之構樹葉對白蝦非特異性免疫反應、成長表現、腸道菌相、抵抗副溶血性弧菌能力及抗氨氮緊迫之影響。
本研究以構樹葉為基質，製備發酵合生元，並建立最適發酵條件以提升功能性成分含量。所得之發酵產物依不同培養基添加處理方式分為三組進行評估（圖一）。抗菌試驗顯示，三組對水產常見病原菌與益生菌如Vibrio parahaemolyticus、V. alginolyticus、V. harveyi、Lactobacillus fermentum、L. paracasei、Bacillus subtilis最低抑制濃度與最低殺菌濃度均大於10000μg／mL（表一），顯示發酵構樹葉抑菌能力有限。然而，成分分析指出FN組具有最高的總酚與類黃酮含量（表二），並展現良好的總酚／類黃酮比例，顯示其具備潛在抗氧化與免疫調節效益。進一步的白蝦血球體外培養試驗顯示，FN組能顯著提升酚氧化酵素活性，促進血球的吞噬作用與呼吸爆能力，並增強細胞的防禦反應，同時於細胞安全性檢測亦顯示發酵構樹葉對白蝦無不良反應（圖三），後續實驗繼續使用FN組發酵構樹葉以體外實驗最適劑量進行飼料製備，28天體內免疫實驗，證實發酵構樹葉做為飼料添加劑可調節非特異性免疫反應及免疫基因表現（圖五）。綜合而言，本研究證實構樹葉發酵合生元，不僅具備抗氧化功能，更能增強白蝦體內及體外的非特異免疫反應。 |
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