棒錘瓜乙酸乙酯抽出物對血小板活性化因子藥理活性的抑制作用

Inhibition of the Pharmacological Actions of Platelet-Activating Factor by Ethyl Acetate Extract of Neoalsomitra Integrifoliola

血小板活性化因子(PAF)在很多致命的病理上如：休克、氣喘、移植排斥及缺血所造成的傷害等佔很重要的角色。最近很多研究室致力於尋找PAF拮抗劑，第一個被發現的PAF拮抗劑銀杏內酯是由天然物獲得的。臺灣民間藥棒錘瓜(Neoalsomitra integrifoliola. Cucurbitaceae)主要用於跌打損傷。最近，我們的研究顯示棒錘瓜甲醇抽出物的乙酸乙酯分層(EtOAc ext.)對鹿角菜引起的大白鼠足蹠浮腫及胸膜炎有很好的抑制作用。PAF引起的發炎作用已有很深入的研究，因此本研究首先檢討EtOAc ext.對PAF引起的種種發炎模式是否也有抑制作用，而後進一步探討EtOAc ext.與PAF之間相互作用的關係。獲得如下的結果。1.對大白鼠皮膚滲透性的影響：大白鼠事先口服EtOAC ext，經30分鐘後，在乙醚麻醉下由陰莖靜脈注入色素Evans blue，而後在腹部皮內注入致發炎劑PAF、緩動素及化合物48/80。經一小時後，在乙醚麻醉下，放血致死。取下直徑20mm大的滲藍皮膚，將之剪碎，而後萃取色素測其吸光度。結果發現EtOAc ext.對PAF的皮膚滲透性有很好的抑制作用，但對緩動素及化合物48/80則無影響。2.對大白鼠足蹠浮腫的影響：大白鼠口服給與EtOAc ext.，經30分鐘後，在右後腳足蹠皮下注入PAF或arachdonic acid (AA)。而後每隔30分或一小時測量浮腫體積。結果顯現EtOAc ext.及dexamethasone對PAF和AA的足蹠浮腫皆具抑制作用。3.對大白鼠胸膜炎的影響：大白鼠胸腔注入PAF，30分鐘後可見滲出液增加及白血球數目減少。6小時後可見滲出液增加減緩，和白血球增加。EtOAc ext.對PAF注入後30分鐘引起的發炎無影響，但對6小時後引起的發炎有抑制作用。4.對小白鼠致死性過敏性休克的影響：小白鼠由尾靜脈注入PAF引起過敏性休克死亡率，可因事先口服給與EtOAc ext.而獲得改善。另外口服dexamethasone可以完全抑制PAF引起的死亡。5.對大白鼠降壓作用的影響：大白鼠皮下注射給與EtOAc ext.經30分鐘後，由股靜脈注入PAF。EtOAc ext.對PAF引起的降壓作用無影響。6.對兔子血小板凝集作用的影響：以3.8% sodium citrate作為抗凝血劑，由兔耳動脈抽取全血，以1: 9(V/, V)之比例混合之。以1000rpm的速度離心10分鐘，所得上層液為platelet-rich plasma (PRP)，PRP在加入凝集劑前工分鐘加入EtOAc ext.，全部凝集反應過程皆在37℃下進行。使用的凝集劑為collagen (20μg/m1)，AA(125μM)，thrombin(0.5μ/ml)，PAF(15pM)，A23187(2.5μM)。EtOAc ext.對這些凝集劑的凝集作用皆有抑制效果，尤以對coilagen，AA最為顯著。由上述結果顯示EtOAc ext.對PAF的抑制作用，不是直接的接受體相互作用，而是間接抑制PAF引起的化學媒介物質釋出。

Neoalsomitra integrifoliola has been used in Taiwanese folk medicine for the treatment of inflammation. In our previous works, we found that increased intraperitoneal vascu1ar permeability and paw edema were inhibited by ethyl acetate extract (EtOAc ext.) of N. integrifoliola. In this report, we further studied the effect of EtOAc ext. on PAF-induced biological phenomena. The following results were obtained: (1) EtOAc ext. depressed skin plasma extravasation induced by PAF, but not by bradykinin and compound 48/80. (2) Both PAF and arachidonic acid (AA) caused paw edema were inhibited by EtOAc ext. (3) EtOAc ext. inhibited pleurisy observed 6 hr , but not 30 min after PAF administration. (4) EtOAc ex t. inhibited anaphylactic shock caused by PAF in mice. (5) PAF-induced hypotension was not affected by EtOAc ext. (6) Platelet aggregation was investigated in rabbit in vitro. EtOAc ext. inhibited PAF-induced aggregation in dose-dependent manner, with an IC50 of 123 μg/ml. AT IC50, it completely inhibited both collagen-and AA-induced aggregation. Our findings suggested that the inhibition of EtOAc ext. on PAF might be due to inhibit the release of chemical mediators by PAF-stimu1ated cells.