中文摘要 |
褐根病(brown root rot disease)是國內林木目前最嚴重的病害,本病害是由病原真菌Phellinus noxius所引起。由於樹木罹病初期不易以外部病徵來診斷,為掌握防治先機,本研究開發新式分子檢測技術,研究成果有助於提高病害診斷效率。本研究主要目標在開發新的LAMP分子檢測技術,(LAMP, Loop-mediated isothermal Amplification)恆溫環狀擴增法,近年逐漸被應用在疫病蟲害的檢測上,LAMP技術與PCR技術主要不同之處在於前者可以在恆溫下反應,所以只需要溫度能達到60-65℃的簡單恆溫儀器,如水浴槽(water bath)或加熱板(heat block)。LAMP技術的特點有:(1)不需要昂貴的PCR儀器,只需要水浴槽或加熱器等恆溫器即可進行反應。對於某些田間檢測、偏遠地區實驗室來說,相當簡單實用。(2)專一性相對高,(3)反應時間短(40~60分鐘),(4)靈敏度高,(5)檢測反應所產生的白色沉澱用肉眼或濁度計即可觀察,相當簡便。若再加入核酸染劑則更有助於觀察,我們進一步比較LAMP技術與先前本實驗室所開發之褐根病PCR診斷技術,分析兩種方法的特性、優勢與劣勢。因此LAMP分子檢測技術是日後進行褐根病感染初期篩檢時之一項有利工具。 |