松杉靈芝三萜類成分靈芝酸之定量   全文下載

Determination of Ganoderic acids in Triterpenoid Constituents of Ganoderma tsugae

靈芝產品為國內保健食品之大宗，松杉靈芝（Ganoderma tsugae）子實體是最常使用的原料品種。本研究自松杉靈芝子實體中分離出九種三?類（triterpenoids ），這些三?類經氫核核磁共振化學位移，紅外線光譜圖及質譜鑑定後，確認為靈芝酸（ganoderic acid） A （1），B （2），C （3），D （4），E （5），C5 （6），C6 （7），G （8）及靈芝烯酸D （9） （ganoderenic acid D）。本研究並建立以逆相高效液相層析（reverse-phase HPLC）法，分析松杉靈芝原料中此九種三類的含量，其中靈芝酸E，C5，C6，G及靈芝烯酸D首次以HPLC分離定量。本實驗之高效液相層析法係採用C18逆相層析管柱，以梯度沖提方式分離，移動相為不同比例之乙?：2%醋酸（1：2 及1：4，體積比），檢測波長為252 nm，流速為0.8 mL／min，得到良好分析結果。九種靈芝酸之線性回歸方程式之相關係數（r）皆大於0.9990 （n = 5），添加試驗回收率為96.85%~105.09%。同日內標準偏差為0.8~4.8%，異日間標準偏差為0.5~5.1%。以此九種三?類總含量計算，利用上述液相層析法，檢測市售六種靈芝產品及二種松杉靈芝原料，其靈芝酸總含量為0.28%~2.2% 。

Ganoderma product has the highest sale volume in the health food market in Taiwan. The most widely-used raw material is the species of G. tsuage. Nine triterpenoids were isolated from the fruiting body of G. tsugae and their structures were identified, using 1H NMR and FT-IR, as ganoderic acid A (1), B (2), C (3), D (4), E (5), C5 (6), C6 (7), G (8) and ganoderenic acid D (9). A reverse-phase HPLC method was also established for the determination of these nine triterpenoids. Among these compounds, ganoderic acid E, C5, C6, G and ganoderenic acid D were analyzed for the first time by reverse-phase HPLC. The separation was carried out on a C18 reverse-phase column with a gradient elution of acetonitrile and 2% acetic acid (1/4 and 1/2, v/v) as mobile phase at a flow-rate of 0.8 mL/min and detection at 252 nm. Regression equation revealed the linear relationship (correlation coefficient: 0.9990~0.9999) between the peak-area ratios and concentrations of ganoderic acids. The recoveries of nine ganoderic acids were between 96.85~105.09%. The relative standard deviations of nine ganoderic acids range from 0.8~4.8% (intraday) and 0.7~5.1% (interday). The total contents of the nine ganoderic acids in eight Ganoderma samples were between 0.28~2.20%. 靈芝產品為國內保健食品之大宗，松杉靈芝（Ganoderma tsugae）子實體是最常使用的原料品種。本研究自松杉靈芝子實體中分離出九種三萜類（triterpenoids ），這些三萜類經氫核核磁共振化學位移，紅外線光譜圖及質譜鑑定後，確認為靈芝酸（ganoderic acid） A （1），B （2），C （3），D （4），E （5），C5 （6），C6 （7），G （8）及靈芝烯酸D （9） （ganoderenic acid D）。本研究並建立以逆相高效液相層析（reverse-phase HPLC）法，分析松杉靈芝原料中此九種三類的含量，其中靈芝酸E，C5，C6，G及靈芝烯酸D首次以HPLC分離定量。本實驗之高效液相層析法係採用C18逆相層析管柱，以梯度沖提方式分離，移動相為不同比例之乙腈：2%醋酸（1 : 2 及1 : 4，體積比），檢測波長為252 nm，流速為0.8 mL／min，得到良好分析結果。九種靈芝酸之線性回歸方程式之相關係數（r）皆大於0.9990 （n = 5），添加試驗回收率為96.85%～105.09%。同日內標準偏差為0.8～4.8%，異日間標準偏差為0.5～5.1%。以此九種三萜類總含量計算，利用上述液相層析法，檢測市售六種靈芝產品及二種松杉靈芝原料，其靈芝酸總含量為0.28%～2.2%。