重組第一類轉形生長因子與篦麻毒素A融合蛋白質對人類癌症細胞之生長抑制效應

癌症細胞尤其是肺癌細胞大多表現高密度之上皮生長因子受體(epiderrnal growth factor receptor;EGFR)，而腫瘤細胞本身會分泌第一類轉型生長因子(transforrning growth factor-α; TGF-α)，當TGF-α與細胞本身或鄰近的EGFR緊密結合之後，造成受體自體磷酸化之後引發細胞內連續訊號傳遞的發生，而促使細胞的增生。若將TGF-α與蓖麻毒素A(ricin A)結合形成重組融合蛋白，由EGFR選擇性結合，進入細胞質後，讓所連結的蓖麻毒素A進入核糖體，使細胞蛋白質轉譯功能降低，故能抑制腫瘤細胞的生長。本文以基因工程方式製作大量重組蛋白—TGF-α-蓖麻毒素A。 實驗首先將TGF-α與蓖麻毒素A的基因選殖出來，進行DNA重組，經限制酵素切割及核酸定序確認有正確的序列之後，植入大腸桿菌，誘導大腸桿菌表現該重組基因後分泌融合蛋白到培養液中，將重組蛋白萃取純化後，用於細胞培養。使用人類上皮癌細胞A431細胞株，以分別測試重組融合蛋白與蓖麻毒素A對癌細胞的抑制效應。