第三B型黏多醣儲積症（MPS ⅢB）：NAGLU基因的突變分析

本研究的目的在分析臺灣四個MPS ⅢB家族的分子致因。聚合酶鏈反應(PCR)放大包含患者NAGLU基因各表現子(exon)片段，經單股核酸構形多型性(SSCP)分析及異偶合(heteroduplex)分析，篩選可能帶有突變的表現子，進行DNA定序，以檢視患者的基因突變。結果發現患者773為複異型合子的突變，其表現子上第220個胺基酸密碼的第三個位置缺失核酶酸C (660delC突變)，表現子6上第565個胺基酸密碼發生CGG→TGG的改變，即由精胺酸Arg轉變成色胺酸Trp(R565W突變)。對偶基因專一的寡核酶酸引子(ASO)雜合的檢測試驗顯示，患者的660delC突變係遺傳白父親，R565W突變則遺傳自母親。患者1146為同型合子的突變，其表現子6上第的6個胺基酸密碼發生CGA→TGA的改變，即由精胺酸轉變成終止密碼(R626X突變)。此變異產生一新的限制蘑DdeI切點，DdeI切割的檢測試驗顯示患者的父親為R626X突變的異型合子。患者1362、1363兄弟皆為同型合子的突變，其表現子2上第130個胺基酸密碼發生CGC→TGC的改變，即由精胺酸轉變成半胱胺酸Cys(R130C突變)。此核酶酸變異使限制酶KpnI的切割點消失，KpnI切割的檢測試驗顯示患者的母親為Rl30C突變的異型合子。患者1377亦為同型合子的突變，其表現子2上第154個胺基酸密碼發生ATA→AGA的改變，即由異白胺酸Il巳轉變成精胺酸(Il54R突變)。此變異經誤配(mismatch)引子的PCR可產生一新的限制臨酶HinfI切點，HinfI切割的檢測試驗顯示，患者的父母親皆為Il54R突變的異型合子。