吳郭魚成魚心室肌細胞之初級培養

本研究主要在建立吳郭魚心室肌細胞的初級培養模式，並觀察細胞在培養過程中外形的變化。實驗方法是將剪碎的心室以protease-collagenase酵素溶液解離，大約可收獲40-50%的正常心肌細胞。將此心肌細胞置入EMEM培養液(內不含glutamine，再外加10%胎牛血清、一倍非必要基酸及抗生素)內，於維持在28℃的CO2培養箱內培養。剛分離的單一心室肌細胞呈細長桿形或長紡綞形、大小長約140-190μm、寬約3-5μm。在掃描電子顯微鏡下觀察，細胞是由數束肌原纖維(myofibrils)構成。細胞表面平滑，沒有橫管(transverse tubule)系統。剛開始培養的心肌細胞外形會漸變成圓形、橢圓形、短桿形或彎曲。培養至5-7天時，細胞才開始附著瓶底，附著率約1%。而後漸漸伸出長偽足向前後兩端延伸，並與鄰近的細胞相接合。此時的細胞會緩慢分裂增殖，甚至長成一片。細胞偶爾會收縮，常會在細胞片中央會形成一個收縮中心，啟動鄰近相連的細胞群同步收縮。在培養的末期，細胞會因收縮拉扯脫離瓶底，而退化死亡。在此環境下細胞並不能繼代及無限增殖，一般約可存活30-60天。