血友病之基因診斷

在嚴重性血友病病人的一生都會有反覆性出血的情況，特別是關節和肌肉方面，並且其它器官或組織也很嚴重。血友病 （Haemophilia）可分成A型血友病及B型血友病，兩者皆為性聯（X-linked）隱性遺傳。A型血友病（Haemophilia A）是最普遍的遺傳性凝血因子的疾病，約占血友病的80-85%，其在男性的發生率為1/5000 。其原因是因為缺乏凝固因子 VIIIc（Coagulation factor VIIIc）或凝固因子VIII功能不正常所引起的。凝固因子VIII的基因是一個很大的基因，最近基因體定序結果顯示也許比目前我們所知的大小更大，位於染色體X長臂 （Xq28）的終端（telomeric end）。基因編碼為 186kb；由26個exons構成，轉譯成一個含19 個胺基酸的訊號胜肽（signal peptide）及含2332 個胺基酸（amino acid）的多胜肽鏈 （polypeptide）。此多胜肽由三種不同的domains 所構成，名為A1-A2-B-A3-C1-C2，其中訊號胜肽在內質網（endoplasmic reticulum）時會被一個訊號胜肽酶移除。B型血友病 （Haemophilia B ）在男性的發生率為 1/30000，是因為缺乏凝固因子IX（factor IX） 或其功能不正常所引起的，因子IX位於 Xq27.1，含34kb，由8個exons構成，轉譯成 6個domains的因子IX，因子IX為一個含415 胺基酸的肝醣蛋白（glycoprotein）。不論A型或B型血友病，攜帶血友病基因的女性有二分之一的機會傳給子女，即兒子有二分之一成為血友病患者，而二分之一的女兒將成為帶因者。帶因者大都無症狀，且血漿中凝固因子活性大都正常，通常只能用分子診斷來做檢測，以往利用linkage analysis來篩檢，linkage analysis雖然便宜，但受限在必須有家族史，即必須有病患檢體，另外還必須考慮重組（recombinant events）和 germline mutation等問題。而直接檢測基因序列（direct sequence），雖然敏感度高，且較準確，但花費非常昂貴，且所須時間也較長，所以，如何改善基因診斷技術，以提高準確率，減少花費及快速診斷，將可以大幅提昇對於血友病之遺傳診斷品質。