篩選幾丁質分解酶生產菌與其酵素之特性分析

Screening of a Chitinase-Producing Strain and Characterization of Its Chitinases

本研究自台北虎山溪之土壤中，篩選出具有生產幾丁質分解酶（chitinase）之菌株，此菌株為革蘭氏陰性桿菌，經食品工業研究所鑑定為Aeromonas hydrophila，命名為Aeromonas hydrophila DYU-Too10。此菌株於CB（chitin broth）培養基中，振盪培養120 h，幾丁質分解酶活性可達316 U/L，其水解產物主要以N-乙醯葡萄糖胺（N-acetylglucosamine）為主。分析粗酵素特性，發現此酵素於酸性環境中易喪失活性，對熱敏感，其最適反應溫度為40°C，最適反應之pH 為7.0。以不同碳源培養此菌株，得知以2%（w/v）粉狀幾丁質作為碳源之酵素產量為最高，而利用其他醣類作為碳源時，菌株則無法大量分泌幾丁質分解酶，推測其所分泌之幾丁質分解酶是由幾丁質誘導產生的。將粗酵素液經硫酸銨沉澱、透析、DEAE-Sepharose CL-6B 及Sephadex G-100 純化後，可獲得具有幾丁質分解酶活性之蛋白質。經活性電泳染色法證實，有三種幾丁質分解酶存在，其分子量分別為40、50 及55 kDa。