HLA分型檢測檢體品質之閾值評估

某些血液疾病之病變細胞存在染色體失去異質性（Loss of Heterozygosity, LOH）的現象。本科發現一案例，因使用具高比例惡性細胞的急性期血液檢體進行人類白血球抗原（Human Leukocyte Antigen, HLA）分型檢測，造成檢測結果呈現僞同合子（false homozygosity）基因型的結果。由於血液細胞核型的分析並未發現異常，故此現象應為病變細胞的第六對染色體形成後天單源雙倍體（Acquired uniparental disomy, aUPD）造成。利用單核苷酸多型性晶片（SNP array）檢測，發現其第六對染色體確有34.6MB長度的aUPD片段，剛好涵蓋HLA基因位置。為了解惡性細胞佔多少比例將可能造成分型的誤判，本研究以混合DNA實驗模擬細胞發生aUPD的現象，再以反向序列特異性寡核苷酸雜交法（PCR- rSSO）進行HLA分型，結果顯示，若代表正常細胞的異合子DNA比例小於30％，以反向序列特異性寡核苷酸雜交法（PCR-rSSO）進行檢測，將可能造成HLA分型的誤判。故當送檢的檢體帶有超過70％的惡性細胞時，就不應用作HLA檢測之標本，而應採取非病灶檢體或以非急性期血液檢體檢測，醫檢人員應該對HLA同合子分型的結果保持警覺，以避免因檢體異常造成HLA分型檢測錯誤的結果。