表現一可被抗弓蟲 SAG1 抗體辨識之重組蛋白質

Expression of a Recombinant Protein which Can Be Recognized by Antibody to Toxoplasma Gondii SAG1

弓蟲感染在人跟動物都會造成嚴重的後果。弓蟲症是一分佈很廣的人畜共通傳染病，因此在經濟及公共衛生上皆很重要。由於弓蟲症缺乏特殊的臨床症狀，必須要使用診斷技術偵測感染。偵測抗弓蟲抗體，是一非常有用的感染指標。然而，只當測試樣品能辨識弓蟲獨特的表面抗原1(SAG1)時，方能確定診斷。SAG1在各種不同株的弓蟲其結構幾乎完全一樣，因此在弓蟲症診斷上為一非常有用的分子。在本研究，SAG1基因經增幅並進一步純化出具有1,011base pairs之核苷酸，然後連接上已去磷酸化直線形的pET-24b載體，形成具有6,320 base pairs之pET-24b/SAG1重組體。將此重組體植入氯化鈣處理過之Escherichia coli後，表現一63 kilodaltons之蛋白質。利用immunoblotting證實，此重組蛋白質亦可被能辨識SAG1分子之弓蟲感染貓的血清所結合。更進一步測試發現，所有30個能辨識表現的重組蛋白質之陽性血清，在使用此重組蛋白質之kinetics-based enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)亦呈陽性。因此，使用此表現的重組蛋白質之ELISA結合了傳統ELISA與費時的immunoblotting兩者之優點，具有非常好的靈敏性與特異性，將成為一調查大量血清樣品之非常有效的工具。此重組蛋白質之可能發展為疫苗使用亦在文中討論。