過去的實驗所製備的TG(HSP70:BMP4)基因轉殖魚品系,可以利用熱緊迫蛋白質(HSP70)之啟動子來驅動BMP4基因Mrna的表現,來探討BMP4基因與頭部軟骨、心臟與消化道器官發育之間的關係。而由文獻中已知BMP4基因在早期胚胎發育背、腹軸形態形成扮演著重要的角色,因此本實驗的目的主要在測試是否經熱休克處理所產生過多的BMP4能影響基因轉殖斑馬魚早期胚胎背、腹軸組織的發育。本實驗以no tail (ntl)脊索標示基因為探討,利用全株原位雜交的方法,來比較不同發育時期的基因轉殖斑馬魚斗胚胎經過37℃,2小時之加熱處理後,對表現在脊索ntl基因的影響。結果顯示:32-64;64-128;128-256細胞期胚胎經熱處理可造成100%bud期胚胎其ntl基因在脊索表現不正常;在256-512細胞期則造成19%bud期胚胎ntl在脊索的兵現在細化(thinner)以及81%有不連續的情形,而在未經熱處理之基因轉殖魚胚胎 ,與不論是否加熱之野生型斑馬魚胚胎ntl在脊索的表現皆是100%正常。因此本實驗結果顯示TG(HSP70:BMP4)基因轉殖魚早期胚胎經過熱處理處,的確可誘發BMP4基因的過度表現,造成ntl的不正常表現進而影響脊索的發育。 |