利用雙片段定量聚合酵素連鎖反應分析p53基因之傷害敏感性與癌症治療效性之相關性研究

Correlation of Damage Formation in the p53 gene with Therapeutic Effectiveness Assayed by Multiplex Long Quantitative PCR

肺癌在台灣地區有相當高的死亡率，其主要原因為患者對於放射線治療或化學治療常常會產生抗性；但由於癌症治療效性不易從病人之臨床病徵上預測，因此，發展一套可以預測病人治療結果的分子指標是相當重要的。此外，在前人的研究中指出p53基因的變異與癌細胞抗藥性的產生有關；再加上病人血液細胞中DNA的變異與組織中癌細胞DNA的變異相關。所以，本研究利用雙片段定量聚合酵素連鎖反應(Multiplex long quantitative polymerase chain reaction, Multiplex long QPCR)的方法，藉由DNA模板上的損傷會抑制PCR反應時DNA聚合酵素的聚合能力，反應完成後比較有傷害與無傷害的DNA反應效率，即可得到DNA的傷害程度的原理，來偵測化療之肺癌病人週邊血液淋巴球細胞之p53基因的傷害敏感性，並分析其和化療結果的關係。實驗的數據顯示，29位化療無效的病人週邊血液淋巴球細胞中，其p53基因對於30 J/m2的紫外線照射之後，有呈現DNA傷害的人數比例為83%(24/29)；而在15位化療有效的病人其p53基因呈現傷害的人數比例則較低(67%，10/15) (P=0.23)。在化療無效且有DNA傷害的病人當中，平均DNA傷害的程度為0.20±0.17/p53分析片段；而化療有效的病人當中，其平均傷害的程度則為0.16±0.17/ p53分析片段(P=0.89)。雖然化療的結果與兩個族群間DNA傷害的程度沒有顯著的差異，但是，可以看出在化療無效的病人中，其DNA傷害的程度有高於化療有效病人的趨勢。因此，利用Multiplex long QPCR的方法來偵測病人血液中的DNA傷害程度，在未來經過更多樣本的確認後，似乎可以作為預測病人治療結果的指標。